什么是细胞分选?基本原理是什么?

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用流式细胞计将特定的细胞分选分选出来的技术,分选前,细胞要被戴上特殊的标记。所用的标记细胞的探针是能够同待分选细胞表面特征性蛋白(抗原)结合的抗体,而这种抗体又能够同某种荧光染料结合。当结合有荧光染料的探针与细胞群温育时,探针就会同具有特异表面抗原的细胞紧紧结合,由于抗体的结合,被结合的细胞带上了荧光标记。细胞被标记之后,除去游离的抗体,并将细胞进行稀释。当稀释的细胞进入超声波振荡器时,极稀的细胞悬浮液形成很小的液滴,一个液滴中只含有一个细胞。液滴一旦形成并通过激光束时,激光束激发结合在细胞表面抗体分子成为一种标签。当液滴逐个通过激光束时,受到两种检测器的检测:如果液滴中含有细胞就会激活干涉检测器(interferencedetector),只有带有荧光标记细胞的液滴才会激活荧光检测器(fluorescencedetector)。当带有荧光标记的液滴通过激光束时,将两种检测器同时激活,引起液滴充电信号使鞘液带上负电荷。由于液滴带有负电荷,移动时就会向正极移动,进入到荧光标记细胞收集器中。如果是含有非荧光标记细胞的液滴进入激光束,只会被干涉检测器检测到,结果使充电信号将液滴的鞘液带上正电荷,从而在移动时偏向负极,被非荧光标记细胞收集器所收集。如果是不含有细胞的液滴进入激光束,则不会被任何检测器所检测,因而不会产生充电信号,液滴的鞘液不会带上任何电荷,所以在移动时不受任何影响直接进入非检测的收集器。


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