1、种菇的选择与处理。选择在适宜的出菇期出菇早、出菇整齐、特征典型、无病虫害、产量高的栽培袋或栽培畦，再从中选择子实体肥大、肉厚、五六成熟的第一或第二潮幼嫩子实体做种菇，采收后的种菇去掉菌柄基部的培养料剩1-2厘米的菌柄。
2、接种场地的消毒与灭菌。可使用接种箱或超净工作台，接种箱在用之前用紫外灯（化学药品或气雾消毒剂）消毒0.5小时以上；超净工作台则在开机20分钟后使用。
3、接种。首先用酒精棉球把手擦拭消毒，再用酒精棉球对种菇全面消毒。然后顺着菌褶的方向从中间撕开。用小镊子从菌柄和菌盖交界部位夹取0.3厘米*0.3厘米*0.5厘米大小的菌肉组织块，迅速接入母种斜面培养基斜面的中央，塞好棉球。
4、培养。在适宜温度条件下培养。
如何进行菌种子实体组织分离
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