1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 菌种来源：普通爆裂玉米表面分离纯化得到。
1.1.2 培养基液体培养基(发酵培养用)：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，pH7.0，121℃下灭菌20min。固体培养基(分离及菌种保藏用)：在上述液体培养基的基础上，添加15～20g琼脂即可。
1.1.3 1000mg/L高岭土悬液的配制取定量高岭土加水搅拌均匀，制成1000mg/L高岭土悬液，现用现配。
1.2 实验方法
1.2.1 絮凝剂产生菌的初筛将分离得到的纯菌株接种到发酵用培养基中，35℃、160r/min振荡培养72h。之后，取2mL发酵液加入到100mL1000mg/L的高岭土悬液中，同时加入2mL浓度为1%的CaCl2溶液作为助滤剂，快速搅拌1min后，视其絮凝矾花出现的快慢和沉降速度来进行絮凝剂产生菌的初筛。
1.2.2 絮凝率的测定方法100mL量筒中加入0.1g高岭土、90mL水、2mL发酵液或0.3g湿絮凝剂，加水至100mL，调pH至7.0，搅拌1min，静置5min，同时以不加发酵液或湿絮凝剂的高岭土悬液作为对照液。取同一高度的上清液用721分光光度计测定OD550nm，通过吸光度值的减少来衡量其絮凝活性，絮凝率的具体计算方法如下[7，8]。絮凝率的计算公式：絮凝率(%)=A-BA×100式中，A—对照上清液550nm处吸光度值；B—样品上清液550nm处吸光度值。
2 结果与讨论
2.1 具有絮凝活性菌株的筛选对从玉米表面分离纯化的菌株进行初筛，得到3株有絮凝活性的菌株。在初筛过程中，我们通过实验发现，有的菌株发酵液有絮凝活性，有的没有，并且有的菌株发酵液甚至有反絮凝的作用，即对高岭土悬液具有一定的稳定作用。通过絮凝率的测定，选出絮凝效果较好的菌株，命名为F 8。F 8于35℃、160r/min发酵培养72h，再将发酵液于5000r/min离心5min，得到沉淀物和上清液，然后分别检测它们的絮凝活性。试验表明，沉淀物有絮凝活性，当沉淀物加入量为0.3g时，絮凝率为30%；而发酵液絮凝率为负值，不但没有絮凝活性，反倒有稳定高岭土悬液的作用。
2.2 影响F 8号菌产生絮凝剂的因素
2.2.1 培养时间对F 8产絮凝剂的影响于35℃、160r/min、培养液的初始pH=7.0的条件下，进行摇床培养，定期测定絮凝率，结果如图1所示。
从图1中可以看出，F 8的絮凝活性随着时间的延长而不断提高。当培养90h以后，絮凝活性达到最大值74.9%，并保持不变。
2.2.2 培养基初始pH对F 8产絮凝剂的影响于35℃、160r/min的条件下，摇床培养72h，考察培养基不同的初始pH对絮凝剂产生的影响，结果如图2所示。
从图2可以看出，培养基的初始pH为8.0时，絮凝活性最高，为47.6%。可以认为，适宜的碱性环境有诱导微生物絮凝剂产生或被释放的作用。但综观整条曲线的变化趋势，我们发现，培养基的初始pH过高或过低都不利于絮凝剂的产生，这可能是由于pH过高或过低都不利于菌体生长的缘故。
2.2.3 培养温度对微生物絮凝剂产生的影响培养基的初始pH=7.0，于160r/min条件下，摇床培养72h，测定不同培养温度下的絮凝活性，结果如图3所示。
从图3可以看出，当培养温度在35～40℃时，絮凝活性较高，为59.5%。而当培养温度较高或者较低时，絮凝活性却有所下降，说明当培养温度在35～40℃时，有利于絮凝活性物质的产生。当培养温度达到45℃时，菌体几乎不生长。
2.2.4 通气量对微生物絮凝剂产生的影响实验中，我们以摇床转速来衡量发酵过程中通气量的大小，从而进行以下实验：于35℃、发酵液初始pH=7.0的条件下，摇床培养72h，考察通气量不同对絮凝剂产生的影响，结果如图4所示。
由图4可以看出，通气量不同，絮凝活性也不同。当转速较高时，即在160～190r/min时，絮凝活性也较高，为38.4%，这可能是由于转速较高时，通气量也较高，促进了菌株生长，从而使菌体达到自溶期或者分泌絮凝剂的成熟期，所以在该条件下所产的絮凝剂絮凝活性较高；反之，当通气量较低时，絮凝活性就较低。但是，转速也不能太高，实验证明，当转速过高时，菌体生长缓慢，随之絮凝活性也有所降低。所以，要获得具有较高絮凝活性的絮凝剂，最好将摇床转速控制在160～190r/min之间。
2.3 F 8灭活后絮凝活性的变化将发酵液离心，沉淀物于100℃水浴加热60min，以检测灭活后絮凝剂絮凝活性的变化情况。灭活前絮凝率为51.9%，灭活后絮凝率为40.9%，灭活后虽较灭活前絮凝率略有下降，但仍具有较好的絮凝性能，这有利于我们在实际应用中将其制成粉状，便于使用，同时，还可以提高该絮凝剂使用的安全性。
3 结论通过筛选分离，得到高絮凝活性的菌株———F 8，采用肉汤培养基，对1000mg/L高岭土悬浮液絮凝，得出该菌产絮凝剂最佳培养条件分别为初始pH值8.0，培养温度35～40℃，摇床转速190r/min，培养时间90h。并且该菌灭活后仍有絮凝效果。
