利咽康颗粒剂抗病毒作用的实验研究

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利咽康颗粒剂由玉竹、葛根知母、麦冬等中药组成,经临床观察对急、慢性咽炎及扁桃体炎均有一定疗效,具有清热解毒,消炎止痛,理气化痰之功效。现将其抗病毒作用的实验研究报告如下。

1 试验材料

1 .1 药品 利咽康颗粒剂(无附加剂浓缩液,含生药量 2894.7g /L),由中国医科大学提供(990715);喉疾灵胶囊(981004)由天津美伦医药有限公司生产;三氮唑核苷981109),由海禾丰制药有限公司生产;病毒株及 HEP-2 由中国预防医学科学院病毒研究所提供。

1.2 动物 BALB/C 小白鼠由中国医科大学实验动物中心提供,动物生产合格证号:辽实条合字 1 号,质量一级合格证号:辽实质字 008 号,由辽宁省实验动物管理委员会签发。

2 方法与结果

2 .1 体内抗病毒试验[1~3] 取纯系 BALB/C 小鼠 60 只,体重 18~22g,雌雄各半,随机分为 6 组,每组 10 只。盐水对照组给予 8.5%NaCl 40ml/kg ;三氮唑核苷组给予三氮唑核苷 129mg/kg ;喉疾灵组给予喉疾灵 268mg/kg ;颗粒剂组 Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ 分别给予利咽康颗粒剂 152g/kg 、 76g/kg、 19g/kg 。以 90% 小鼠死亡量流感病毒( H3N2 )滴鼻感染小鼠,2h 后各组灌胃给予上述药物,连续 14 天,记录各组小鼠死亡数,平均存活天数,颗粒剂 152g/kg、76g/kg 组存活天数明显增加。结果见表 1 。表1 体内抗病毒试验 (略)

2.2 体外抗病毒试验[1~3] 将冷冻的 HEP-2 悬液,放入 38 ℃水溶液中,使其迅速融化。将细胞悬液接种入培养瓶中,加入 Eagle MEM 生长液,每 24h换液 1 次。细胞生长成单层后,即可用于传代及增殖病毒。用 Reel Muench 法测定流感病毒( H3N2 )和腺病毒(6,Ton99 )增殖的 TCID50[4]。

将连续传代的人上皮细胞( HEP-2 )接种在 96 孔微量细胞培养板上,37℃ CO2 培养箱中,长成层后各 8 孔加入颗粒剂药液 1g/ml、 100mg/ml、 10mg/ml、 1mg/ml 、 0.1mg/ml 继续培养,实验表明: 10mg/ml 以下浓度细胞生长良好。在 10mg/ml 以下各孔中分别加入 30TCID50 的流感病毒( H3N2 )和腺病毒( 6,Ton99 )各 4 孔,同时设病毒对照,细胞对照、颗粒剂药物对照、阳性药对照各 4 孔,37 ℃培养,每天在倒置显微镜下观察,连续 72h 。病毒唑( 0.25mg/ml ),利咽康颗粒剂( 10mg/ml )对病毒致 CPE 作用有抑制作用。结果见表2 。 表2 利咽康颗粒剂 略)

3 讨论

利咽康颗粒剂由玉竹、葛根、知母、麦冬等中药组成,经临床观察对急、慢性咽炎及扁桃体炎均有一定疗效,具有清热解毒,消炎止痛,理气化痰之功效。本次实验主要验证其抗病毒作用。病毒引起的急慢性咽炎及扁桃体炎其主要致病病毒为流感病毒和腺病毒等[5]。 因此,实验中我们用上述病毒进行了体内外实验观察利咽康颗粒剂的疗效。结果表明:利咽康颗粒剂具有明显的抗病毒作用,可提高流感病毒感染小鼠的存活天数;体外实验证实可抑制流感病毒和腺病毒的生长繁殖,但是,需较高药物浓度。这可能与中药通过调节机体生理功能治疗疾病的特性有关。

【参考文献】

1 卫生部药品审评办公室编.中药新药药理学研究指南.北京:人民卫生出版社,1992,55.

2 徐叔云.药理实验方法学.北京:人民卫生出版社,1991,1340-1382,1397-1415.

3 陈奇. 中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1994,258-269.

4 Nathalie J,Schmidt,Richard W. Emmons:Diagnostic procedures for viral,rickettsial and chlamydial infections. American Public Health Association,1993,177-199,515-538.

5 陈国桢. 内科学.北京:人民卫生出版社,1987,19-22.

2 110003 辽宁沈阳,中国医科大学第二附属医院


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